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附　錄　B
產品微生物檢測方法
B.5　金黃色葡萄球菌檢測方法
B.5.1　操作步驟
B.5.1.1　增菌培養：取樣液 5.0 mL，加入到 50 mL SCDLP 培養液中，充分混勻，置 36 ℃±1 ℃ 培養18 h～24 h。
B.5.1.2　分離培養：自上述增菌懸液中取 1～2 接種環，劃線接種 Baird Parker 培養基（）或血瓊脂培養基，置 36 ℃±1 ℃ 培養 24 h～48 h。在 Baird Parker 培養基上為圓形，光滑，凸起，濕潤，直徑為2.0 mm～3.0 mm,顏色呈灰色到黑色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明帶，用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的軟度。偶爾會遇到非脂肪溶解的類似菌落，但無混濁帶及透明帶。在血瓊脂平皿上典型菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。
B.5.1.3　染色鏡檢：挑取典型菌落，涂片作革蘭染色鏡檢，金黃色葡萄球菌為革蘭陽性球菌，排列成葡萄狀，無芽孢與莢膜。鏡檢符合上列情況，還需進行甘露醇發酵試驗和血漿凝固酶試驗。
B.5.1.4　甘露醇發酵試驗：取血瓊脂平皿上典型菌落接種甘露醇培養液，置 36 ℃±1 ℃ 培養 24 h，發酵甘露醇產酸者為陽性。
B.5.1.5　血漿凝固酶試驗（試管法）：吸取 1:4 新鮮血漿或凍干血漿生理鹽水溶液 0.5 mL，放小試管中，加入等量待檢菌 24 h 肉湯培養物 0.5 mL，混勻，放 36 ℃±1 ℃ 溫箱或水浴中，每 30 min 觀察一次，24 h 之內呈現凝塊即為陽性。同時以已知血漿凝固酶陽性和陰性菌株肉湯培養物各 0.5 mL 作為陽性與陰性對照。
B.5.1.6　其他檢驗：使用生化鑒定試劑或生化鑒定卡的，依據商品試劑說明書對可疑菌落進行鑒定。
B.5.2　結果報告
凡在瓊脂平皿上有可疑菌落生長，鏡檢為革蘭陽性呈葡萄狀排列的球菌，并能發酵甘露醇產酸，血漿凝固酶試驗陽性者，可報告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。

附　錄　E
產品殺菌性能、性能與穩定性檢測方法
E.5.2　載體浸泡定量殺菌試驗
E.5.2.1　適用范圍
適用于黏稠狀（半固體）產品如洗手液等對微生物效果的鑒定。
E.5.2.2　染菌載體制備
取試驗菌 24 h 新鮮斜面培養物用 PBS 洗下，用 PBS 稀釋至約 5.0×10 6 CFU/mL～5.0×10
CFU/mL 制成菌懸液備用。用微量移液器滴染 10 μL 菌懸液于載體上，35 ℃±1 ℃ 烘干或室溫晾干備用。
E.5.2.3　中和劑鑒定試驗
E.5.2.3.1　試驗分組
第 1 組：5.0 mL 中和劑 + 染菌載體 → 培養。
第 2 組：（含劑的載體 + 5.0 mL 中和劑）+ 染菌載體→ 培養。
第 3 組：5.0 mL 稀釋液 + 染菌載體→ 培養。
第 4 組：稀釋液 + 中和劑 + 培養基 → 培養。
E.5.2.3.2　試驗步驟
根據試驗分組，準備試管和平皿，依次進行編號。
第 1 組：取 5.0 mL 中和劑于無菌平皿中，置 20 ℃±1 ℃ 水浴 5 min，加入 1 片染菌載體，作用10 min，取出菌片放入 5.0 mL 中和劑試管內，作用 10 min 后，置渦旋振蕩器上振蕩 1 min 或在手掌上用力振打 80 次，將試驗菌洗下，用中和劑做 10 倍系列稀釋后，選擇適宜稀釋度，分別吸取 1.0 mL 接種于2 個平皿中，做活菌培養計數。
第 2 組：取 5.0 mL 中和劑于無菌平皿內，加入 1 片沾有樣品的載體，混勻，置 20 ℃±1 ℃ 水浴作用 10 min 制成中和產物。再用無菌鑷子取 1 片染菌載體，浸于中和產物中作用 10 min 后，用無菌鑷子取出染菌載體移入含 5.0 mL 中和產物試管中，作用 10 min，振蕩，將試驗菌洗下，用中和產物做 10 倍系列稀釋,選適宜稀釋度分別吸取 1.0 mL 接種于 2 個平皿中，做活菌培養計數。
第 3 組：取 5.0 mL PBS 于無菌平皿中，置 20 ℃±1 ℃ 水浴 5 min，加入 1 片染菌載體，作用 10 min，取出菌片放入 5.0 mL PBS 試管內，作用 10 min 后，振蕩，將試驗菌洗下，用 PBS 做 10 倍系列稀釋, 選適宜稀釋度分別吸取 1.0 mL 接種于 2 個平皿中，做活菌培養計數。
第 4 組：分別吸取稀釋液（PBS）與中和劑各 1.0 mL 于同一無菌平皿內，倒入同批次的培養基15 mL～20 mL，培養觀察。
E.5.2.3.3　結果判定
第 1 組、第 2 組和第 3 組有相似量試驗菌生長，且菌量在 1.0×10 4 CFU/片～9.0×10 4 CFU/片。計算組間菌落數誤差率［計算見公式（E.2）］，其組間菌落數誤差率應不超過 15％。
第 4 組無菌生長，否則，說明試劑有污染，應更換的試劑重新進行試驗。
試驗 3 次，每次試驗均應符合以上要求。

附　錄　E
產品殺菌性能、性能與穩定性檢測方法
E.6　產品性能試驗
E.6.1　劑性能試驗
E.6.1.1　適用范圍
適用于液體劑對微生物效果的測定。
GB 15979-2024
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E.6.1.2　試驗步驟
取新鮮制備的菌懸液 0.5 mL 滴加于 4.5 mL 樣液內，混勻后開始計時，作用至預定時間，用定量吸管吸取菌藥混懸液 0.5 mL 放入 4.5 mL 稀釋液的試管內，充分混勻，分別吸取 1.0 mL 接種平皿，每管接種 2 個平皿，將冷至 40 ℃～45 ℃ 熔化的營養瓊脂培養基（細菌）或沙堡弱瓊脂培養基（酵母菌），傾注于已加入樣液的平皿中，每平皿 15 mL～20 mL，轉動平皿，使其充分混勻，瓊脂凝固后翻轉平皿，36 ℃±1 ℃ 培養 48 h（細菌）或 72 h（酵母菌），進行活菌菌落計數。試驗同時用稀釋液代替試樣，進行平行試驗，作為陽性對照，回收菌數為 1.0×10 4 CFU/mL～9.0×10 4 CFU/mL。
試驗 3 次，計算率。
E.6.1.4　評價標準
各次試驗率 Y 均大于或等于 50％到小于 90％之間，產品有作用；各次試驗率均大于或等于 90％，產品有較強作用。
劑的長作用時間不應超過 5 min。



以下內容轉自“食品接觸材料科學”公眾號，原標題《造紙化學品中氯.丙.醇的測試方法團標發布》，此公眾由我們總部FCM實驗室運營。
近日，由IQTC提出并推動立項的團體標準 T/CNFIA 206-2024 《造紙化學品中氯.丙.醇含量的測定 氣相色譜-質譜法》已經由食品工業協會正式發布。標準已于2024年7月14日起正式實施。標準文本歡迎索閱。
立項背景
GB 4806.8-2022《食品安全國家標準 食品接觸用紙和紙板材料及制品》對食品接觸用紙制品中氯.丙.醇的水提取量設定了嚴格的要求，現有研究顯示造紙化學品可能是其主要來源之一，因此控制其含量成為生產企業亟需解決的重要任務。
由IQTC牽頭起草的GB 4806.8-2022《食品安全國家標準 食品接觸用紙和紙板材料及制品》中對食品接觸用紙制品中氯.丙.醇的水提取量給出了嚴格的要求，而已有的研究表明，造紙化學品可能是紙制品中氯.丙.醇的重要來源之一，因此管控造紙化學品中氯.丙.醇的含量成為食品接觸用紙的生產企業需要解決的一項重要任務。
造紙階段用到的大量化學品中，可能會有部分化學品中含有來自于氯.丙.醇的氯.丙.醇殘留，隨著生產鏈的傳遞和食品接觸用紙制品向所接觸的食品發生遷移，氯.丙.醇可能終會隨食品進入，影響消費者健康安全。
但我國對于造紙化學品中的氯.丙.醇尚缺乏相關檢測方法標準，這給造紙企業及上游化學品生產企業管控造紙化學品中的氯.丙.醇帶來困難。為彌補標準領域的這一不足，IQTC于2023年6月向食品工業協會提出了團體標準立項申請，并于2023年7月獲得正式立項，總共有12家單位共同參與了為期一年的起草。
參編單位包括：濟寧南天農科化工有限公司、四川洋淼環保科技有限公司、浙江傳化華洋化工有限公司、杭州杭化哈利瑪化工有限公司、廣東良仕工業材料有限公司、珠海紅塔仁恒包裝股份有限公司、山東奧賽新材料有限公司、愛森（中.國）絮凝劑有限公司、索理思（上海）化工有限公司、廣州海關技術中心、保世高（廣州）貿易有限公司、食品工業協會食品接觸材料。
標準主要內容
標準適用于檢測造紙化學品中游離態氯.丙.醇的含量，涵蓋濕強劑、粘缸劑、防油劑等多種化學品。通過直接稀釋-氣相色譜-質譜法和衍生化反應-氣相色譜-質譜法兩種方法，分別適用于不同含量級別的化學品，為造紙企業和上游化學品生產企業提供了科學的檢測和管控方法。
本標準適用于造紙化學品中游離態氯.丙.醇含量的檢測，包括但不限于濕強劑、粘缸劑、防油劑、消泡劑、涂布抗水劑、表面施膠劑、模塑防水劑、改性淀粉、改性松香、改性纖維素、改性樹脂等。
標準采用兩種方法對氯.丙.醇進行檢測：
【方法一】直接稀釋-氣相色譜-質譜法
無需使用昂貴的同位素試劑進行衍生化反應，測試成本低廉、操作簡便，適用于氯.丙.醇含量在ppm數量級的造紙化學品。
▲參考色譜圖【方法一】
【方法二】衍生化反應-氣相色譜-質譜法
通過衍生化反應提高檢測靈敏度，檢出限可低至0.01 mg/kg。
▲參考色譜圖【方法二】

意義和影響
本標準的制定為造紙化學品生產企業做好產品中氯.丙.醇的管控、以及造紙企業做好原材料中氯.丙.醇的管控提供了科學的檢測方法。這也將為下游紙制品企業生產的食品接觸用紙和紙制品做好氯.丙.醇的合規提供重要的解決思路。
IQTC期待與各方開展更多高水平合作，為行業和相關部門提供更多高水平技術服務和解決方案。

以上內容轉自“食品接觸材料科學”公眾號，原標題《造紙化學品中氯.丙.醇的測試方法團標發布》，此公眾由我們總部FCM實驗室運營。
我們總部FCM實驗室可以做團體標準 T/CNFIA 206-2024氯.丙.醇含量的測試，有需求的企業，可以與我們聯系。
聯系人：鄒工

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